중국, 화장품 미생물 검사 '위음성' 줄인다

배지 품질·방부제 간섭 검증 강화…버크홀데리아 검사법도 신설

중국이 화장품 미생물 검사의 정확도를 높이기 위해 시험 절차와 품질관리 기준을 강화한다. 제품에 함유된 방부제의 항균 작용으로 미생물 오염을 발견하지 못하는 문제를 줄이고, 기존 검사법으로 충분히 관리하지 못했던 유해 미생물에 대한 검출 방법도 마련했다.

중국 국가약품감독관리국(NMPA)은 2일 '화장품 미생물 시험법 총칙' 등 7개 시험법을 '화장품 안전기술규범'에 반영한다고 발표했다. 공고 제105호에 따라 기존 미생물 시험법 5종이 개정되고, 버크홀데리아 세파시아 복합균군 검사법과 콜라겐 겔 안자극 시험법이 새롭게 도입된다.

중국식품약품검정연구원(NIDC)은 같은 날 공개한 해설에서 화장품의 제형이 다양해지고 방부 시스템이 복잡해지면서 기존 시험법의 한계가 드러났다고 설명했다. 특히 방부 성분의 미생물 억제 작용을 적절히 제거하지 못하면 오염된 제품이 검사에서 음성으로 판정될 수 있다는 점을 개정 배경으로 제시했다.

개정된 미생물 시험법 5종과 신규 BCC 검사법은 2027년 12월 1일부터 시행된다. 콜라겐 겔 안자극 시험법은 이보다 앞선 2027년 5월 1일 적용되며, 시행 전에도 화장품 등록·비안 관련 검사에 새 방법을 활용하도록 권장한다.

방부제 간섭 제거·배지 품질 검증 강화

이번 개정의 핵심은 화장품에 미생물이 존재하더라도 검사 과정에서 발견되지 않는 '위음성' 위험을 줄이는 것이다. 기존 2015년판 화장품 안전기술규범에는 배지 품질평가와 시험법 적합성 검증에 관한 요구사항이 부족했다.

화장품은 미생물 증식을 억제하기 위해 다양한 방부 성분을 사용한다. 그러나 검사 과정에서도 방부 효과가 지속되면 실제 제품에 존재하는 미생물이 배양되지 않아 오염 여부를 정확히 판단하기 어려울 수 있다. NIDC는 검사 전처리 과정에서 이러한 영향을 제거하고 시험법이 해당 제품에 적합한지 확인할 필요가 있다고 설명했다.

개정된 미생물 시험법 총칙에는 정량·정성 검사에 대한 적합성 시험 절차가 추가됐다. 제품의 항균 작용을 줄이기 위해 시료를 희석하거나 중화제를 사용하고, 필요에 따라 막여과법을 적용하는 방법을 구체화했다. 검사 결과를 신뢰할 수 있는지 사전에 검증하기 위한 조치다.

미생물을 배양하는 배지의 품질관리 요건도 강화됐다. 배지 생산 배치마다 미생물 성장 촉진 능력과 억제 능력, 생화학적 특성을 평가하도록 규정했다. 비교 기준으로 사용할 참조 배지 체계를 도입해 배지별 품질 차이가 검사 결과에 미치는 영향을 줄이려는 목적이다.

시험실 운영 기준도 보다 구체적으로 정해졌다. 검사 환경과 인력, 장비, 검사 용품, 균주 관리 등 5개 영역에 기본 요건을 마련하고 청정구역과 생물안전 2등급(BSL-2) 시험실, 검사 인력 자격에 관한 내용을 명시했다. 대조시험과 인력 평가, 검사 후 병원성 미생물이 포함된 시료의 무해화 처리 등 생물안전 관리 절차도 포함됐다.

일반세균 수를 측정하는 균락 총수 시험법에는 막여과법이 추가됐다. 세척액의 양을 조절하거나 중화제가 포함된 희석액을 사용해 시료의 항균 작용을 제거할 수 있도록 했다. 검사 과정에서 사용할 품질관리용 균주 3종을 추천하고, 막여과법을 이용한 계수 및 결과 보고 기준도 새로 마련했다.

균종별 검사 절차 정밀화

개별 미생물 검사법에서는 배양 조건과 판정 절차를 조정해 검출 정확도를 높이는 데 초점을 맞췄다.

내열성 대장균군 검사법은 기존 1단계 발효 방식을 2단계로 변경했다. 먼저 36±1℃에서 초기 발효를 진행해 미생물의 회복을 유도한 뒤, 44.5±0.5℃에서 추가 발효하는 방식이다. 기존 방법은 시료 희석도가 낮고 배양 온도가 높아 제품 성분의 영향을 받을 가능성이 있었다. NIDC는 단계별 발효를 통해 검출 민감도를 높이고 위음성 발생을 줄일 수 있다고 설명했다.

검사 결과를 판정하는 과정에서 인돌시험 단계도 삭제했다. 내열성 대장균군의 특성을 기준으로 판정 절차를 조정하면서 검사 비용을 줄일 수 있도록 했다.

황색포도상구균 검사법은 증균 배양시간을 기존 24시간에서 24~48시간으로 조정했다. 충분한 검증을 거친 경우에 적용하는 조건으로, ISO 등 국제표준을 참고해 검출 민감도를 높이기 위한 변경이다.

균주를 확인하는 방법도 다양해졌다. 기존 검사법에 생화학적 동정 키트와 미생물 동정 시스템을 추가해 시험기관이 여건에 맞는 방법을 선택할 수 있도록 했다. 필요한 경우 시험법 적합성을 검증하는 절차와 권장 품질관리 균주 정보도 반영했다.

곰팡이·효모균 총수 검사법에서는 배지 조성과 배양 온도, 계수 범위가 함께 바뀐다. 기존 로즈벵갈 배지에 레시틴과 트윈80을 추가해 방부 성분의 억제 효과를 줄이고, 배양 온도는 28±2℃에서 25±1℃로 낮춘다.

적정 균락 계수 범위는 기존 5~50CFU에서 15~150CFU로 확대된다. ISO 16212:2017을 참고한 변경으로, 무작위 계수 오차를 줄이기 위한 조치다. 일반적인 희석이나 중화 처리로 방부 성분의 영향을 충분히 제거할 수 없는 제품에는 적합성 검증을 거쳐 막여과법을 적용할 수 있도록 했다.

NIDC는 검사법 개정을 통해 제품의 실제 미생물 오염 수준을 보다 정확하게 파악할 수 있을 것으로 보고 있다. 특히 어린이용이나 눈·입술 주변에 사용하는 제품처럼 미생물 관리 기준이 엄격한 화장품의 품질 평가에도 도움이 될 것이라는 설명이다.

신규 유해균 검사법·동물대체시험 도입

기존 규범에 별도 검사법이 없었던 버크홀데리아 세파시아 복합균군(Burkholderia cepacia complex·BCC)에 대해서는 새로운 검출 방법이 마련됐다.

BCC는 면역력이 낮은 사람에게 심각한 건강 문제를 일으킬 수 있는 조건부 병원성 미생물이다. NIDC에 따르면 중국의 화장품 위험 모니터링 과정에서 해당 균군이 검출된 사례가 확인됐지만, 기존 안전기술규범에는 화장품 전용 검사법이 마련돼 있지 않았다.

새로운 시험법은 미생물의 증균 배양부터 분리·동정에 이르는 절차를 통일했다. 시료에 적은 양으로 존재하는 균을 검출하기 위해 SCDLP 액체배지를 사용하며, 이후 버크홀데리아 세파시아 선택배지(BCSA)에서 의심 균락을 분리하도록 했다.

분리 배양 조건은 36±1℃에서 48~72시간이다. 균주 동정에는 염색·현미경 검사와 카탈라아제, 라이신 탈탄산효소, 구연산염 이용 시험 등을 활용한다. 생화학적 동정 키트나 미생물 동정 시스템을 대체 방법으로 사용할 수도 있다.

일상적인 검사에서는 개별 균종까지 구분하지 않고 BCC 균군 수준에서 확인하는 것으로 충분하다. 보다 세부적인 균종 식별이 필요한 경우 분자생물학적 분석을 추가할 수 있다.

이번 조치는 기존에 통일된 검사법이 없었던 미생물에 대해 공식적인 시험 절차를 마련한 것이다. 이번 공고는 BCC의 검사 방법을 새롭게 규정한 것으로, 모든 화장품에 대한 일률적인 검사 의무나 별도의 미생물 허용기준을 신설하지는 않았다.

미생물 관리와 별개로 화장품 원료의 안전성 평가에 활용할 수 있는 콜라겐 겔 안자극 시험법도 신설됐다.

해당 시험법은 경제협력개발기구(OECD)의 2026년 개정 시험지침 TG 494를 참고해 개발됐다. 동물실험 의존도를 줄이기 위한 대체시험법으로, 단일 성분으로 구성된 화장품용 화학 원료의 눈 자극성을 평가하는 데 적용된다.

각막 상피세포 모델을 공기와 액체의 경계면에서 배양하고 전기저항을 측정하는 방식이다. NIDC는 새로운 방법이 기존 안자극 평가체계를 보완하고, 여러 시험 결과를 종합해 유해성을 판단하는 통합 평가전략의 선택지로 활용될 수 있다고 설명했다.

검사기관과 화장품 기업은 기존 미생물 검출 절차뿐 아니라 배지 품질관리, 방부제 간섭 제거, 시험법 적합성 검증 등 새롭게 도입된 요건을 검토해야 할 것으로 보인다.